產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹：
卵母細胞膜片鉗又稱(chēng)單通道電流記錄技術(shù)，用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面，使之形成10～100的密封(giga-seal)，又稱(chēng)巨阻封接，被孤立的小膜片面積為μm量級，內中僅有少數離子通道。然后對該膜片實(shí)行電壓鉗位，可測量單個(gè)離子通道開(kāi)放產(chǎn)生的pA（10的負12次方安培）量級的電流，這種通道開(kāi)放是一種隨機過(guò)程。
詳情介紹：
卵母細胞膜片鉗又稱(chēng)單通道電流記錄技術(shù)，用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面，使之形成10～100的密封(giga-seal)，又稱(chēng)巨阻封接，被孤立的小膜片面積為μm量級，內中僅有少數離子通道。然后對該膜片實(shí)行電壓鉗位，可測量單個(gè)離子通道開(kāi)放產(chǎn)生的pA（10的負12次方安培）量級的電流，這種通道開(kāi)放是一種隨機過(guò)程。通過(guò)觀(guān)測單個(gè)通道開(kāi)放和關(guān)閉的電流變化，可直接得到各種離子通道開(kāi)放的電流幅值分布、開(kāi)放幾率、開(kāi)放壽命分布等功能參量，并分析它們與膜電位、離子濃度等之間的關(guān)系。還可把吸管吸附的膜片從細胞膜上分離出來(lái)，以膜的外側向外或膜的內側向外等方式進(jìn)行實(shí)驗研究。這種技術(shù)對小細胞的電壓鉗位、改變膜內外溶液成分以及施加藥都很方便。
卵母細胞膜片鉗主要用途
應用卵母細胞膜片鉗技術(shù)可以直接觀(guān)察和分辨單離子通道電流及其開(kāi)閉時(shí)程、區分離子通道的離子選擇性、同時(shí)可發(fā)現新的離子通道及亞型，并能在記錄單細胞電流和全細胞電流的基礎上進(jìn)一步計算出細胞膜上的通道數和開(kāi)放概率，還可以用以研究某些胞內或胞外物質(zhì)對離子通道開(kāi)閉及通道電流的影響等。同時(shí)用于研究細胞信號的跨膜轉導和細胞分泌機制。結合分子克隆和定點(diǎn)突變技術(shù)，膜片鉗技術(shù)可用于離子通道分子結構與生物學(xué)功能關(guān)系的研究。
利用膜片鉗技術(shù)還可以用于藥在其靶受體上作用位點(diǎn)的分析。如神經(jīng)元煙堿受體為配體門(mén)控性離子通道，膜片鉗全細胞記錄技術(shù)通過(guò)記錄煙堿誘發(fā)電流，可直觀(guān)地反映出神經(jīng)元煙堿受體活動(dòng)的全過(guò)程，包括受體與其激動(dòng)劑和拮抗劑的親和力，離子通道開(kāi)放、關(guān)閉的動(dòng)力學(xué)特征及受體的失敏等活動(dòng)。使用膜片鉗全細胞記錄技術(shù)觀(guān)察拮抗劑對煙堿受體激動(dòng)劑量效曲線(xiàn)的影響，來(lái)確定其作用的動(dòng)力學(xué)特征。然后根據分析拮抗劑對受體失敏的影響，拮抗劑的作用是否有電壓依賴(lài)性、使用依賴(lài)性等特點(diǎn)，可從功能上區分拮抗劑在煙堿受體上的不同作用位點(diǎn)，即判斷拮抗劑是作用在受體的激動(dòng)劑識別位點(diǎn)，離子通道抑或是其它的變構位點(diǎn)上。
卵母細胞膜片鉗主要用途
- 金屬離子作用于細胞膜行為的研究
- 細胞膜離子通道的性質(zhì)鑒定及其動(dòng)
- 力學(xué)研究
- 細胞分泌的研究
- 信號轉導的研究
- 分子生物學(xué)研究
應用卵母細胞膜片鉗技術(shù)可以直接觀(guān)察和分辨單離子通道電流及其開(kāi)閉時(shí)程、區分離子通道的離子選擇性、同時(shí)可發(fā)現新的離子通道及亞型，并能在記錄單細胞電流和全細胞電流的基礎上進(jìn)一步計算出細胞膜上的通道數和開(kāi)放概率，還可以用以研究某些胞內或胞外物質(zhì)對離子通道開(kāi)閉及通道電流的影響等。同時(shí)用于研究細胞信號的跨膜轉導和細胞分泌機制。結合分子克隆和定點(diǎn)突變技術(shù)，膜片鉗技術(shù)可用于離子通道分子結構與生物學(xué)功能關(guān)系的研究。
利用膜片鉗技術(shù)還可以用于藥在其靶受體上作用位點(diǎn)的分析。如神經(jīng)元煙堿受體為配體門(mén)控性離子通道，膜片鉗全細胞記錄技術(shù)通過(guò)記錄煙堿誘發(fā)電流，可直觀(guān)地反映出神經(jīng)元煙堿受體活動(dòng)的全過(guò)程，包括受體與其激動(dòng)劑和拮抗劑的親和力，離子通道開(kāi)放、關(guān)閉的動(dòng)力學(xué)特征及受體的失敏等活動(dòng)。使用膜片鉗全細胞記錄技術(shù)觀(guān)察拮抗劑對煙堿受體激動(dòng)劑量效曲線(xiàn)的影響，來(lái)確定其作用的動(dòng)力學(xué)特征。然后根據分析拮抗劑對受體失敏的影響，拮抗劑的作用是否有電壓依賴(lài)性、使用依賴(lài)性等特點(diǎn)，可從功能上區分拮抗劑在煙堿受體上的不同作用位點(diǎn)，即判斷拮抗劑是作用在受體的激動(dòng)劑識別位點(diǎn)，離子通道抑或是其它的變構位點(diǎn)上。
